ELISA试剂盒-检测试纸条-快速检测卡-山东美正生物科技有限公司

概要?

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DeoxynivaLenoL）又稱嘔吐毒素 （Vomitoxin）屬于霉菌的單端孢菌素族，由某些鐮刀霉真菌屬產(chǎn)生。嘔吐毒素多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實(shí)樣本中，由于其具有強(qiáng)的細(xì)胞毒性及免疫抑制性質(zhì)，對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅。?

本試劑盒是應(yīng)用ELISA最新技術(shù)研發(fā)而成的毒素檢測(cè)產(chǎn)品，與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，操作時(shí)間需20min，能減少工作強(qiáng)度和操作誤差。?

實(shí)驗(yàn)原理?

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA 方法，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被嘔吐毒素抗原，樣本中的嘔吐毒素和微孔上預(yù)包被的抗 原競(jìng)爭(zhēng)嘔吐毒素抗體（抗試劑），同時(shí)嘔吐毒素抗體與酶標(biāo)二抗（酶標(biāo)物）相結(jié)合，經(jīng)TMB 底物顯色，樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的校準(zhǔn)系數(shù)，即可得出樣本中嘔吐毒素的含量。?

貯藏條件及有效期?

貯藏條件：保存試劑盒于 2~8℃。?

有效期：該產(chǎn)品有效期為 12 個(gè)月。

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25℃）平 衡 1h 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃。切 勿冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、請(qǐng)注意反應(yīng)溫度不宜過高，控制溫度在 20~25℃。?

5、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo) 準(zhǔn)品做 2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置（建 議在一次實(shí)驗(yàn)過程中，若使用 8 道移液器則標(biāo)準(zhǔn)品和樣本 的總量不宜超過 48 個(gè)，即不宜超過 6 個(gè)檢測(cè)條；建議若 使用單道移液器則不宜超過 16 個(gè)，即不宜超過 2 個(gè)檢測(cè) 條）。?

6、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本 50μL 到對(duì)應(yīng)的微孔中， 加酶標(biāo)物 50μL /孔，再加入抗試劑 50μL /孔（加抗試劑時(shí) 請(qǐng)使用多道移液器），輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?

7、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液 250μL /孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔 10s，在吸水紙上拍干（拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。?

8、顯色：加入底物液 100μL /孔（加底物液時(shí)請(qǐng)使用多道移 液器），用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環(huán)境反應(yīng) 5min。?

9、測(cè)定：加入終止液 50μL /孔（加終止液時(shí)請(qǐng)使用多道移液 器），輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于 450nm 處（建議用 雙波長(zhǎng) 450/630nm 檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定 每孔 OD 值。