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試劑盒
首頁 食品安全快速檢測 乳及乳制品 牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒

檢測項目:優質乳工程

適用樣本:生鮮奶、巴氏殺菌奶、奶粉

規格
96T/盒
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產品介紹
概述

概要?

乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白,中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。 乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉運,而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗 癌、調節免疫系統等強大生物功能,被認為是一種新型抗菌、 抗癌藥物和極具開發潛力的食品和飼料添加劑。?

本試劑盒是應用 ELISA 技術研發的新一代牛乳鐵蛋白檢測產品,操作時間需 45min,能減少操作誤差和工作強度。?


實驗原理?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 方法,在酶標微孔上預包被牛乳鐵蛋白抗體,預包被的牛乳鐵蛋白抗體與酶標抗體 (酶標物)同時與樣本中的牛乳鐵蛋白結合,形成抗體—牛乳鐵蛋白—酶標抗體復合物,經 TMB 底物顯色,樣本吸光值與牛乳鐵蛋白的含量呈正相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣本中牛乳鐵蛋白的含量。?


適用范圍?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒可定性、定量檢測奶粉樣本中牛乳鐵蛋白的含量。


貯藏條件及有效期?

貯藏條件:保存試劑盒于 2~8℃。?

有效期:該產品有效期為 12 個月。

檢測步驟

1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 1 小時或 37℃溫箱平衡 30min 以上,注意每種液體試劑 使用前均須完全溶解搖勻。

2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本:加牛乳鐵蛋白酶標物 50μL/孔到對應的微 孔中,再加入標準品或樣本 50μL/孔。輕輕振蕩混勻,用 蓋板膜蓋板后置 37℃避光環境中反應 15min。?

6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置 37℃避光環境中反 應 10min。?

8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內讀完數據),測定每孔 OD 值。

注意事項
1、試劑及樣本沒有回溫到(20~25℃)會導致所有標準的 OD值偏低。 2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。 3、每加一種試劑前需將其搖勻。 4、反應終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。 5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。 6、儲存條件: 保存試劑盒于 2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進原錫箔袋中重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質的跡象:發色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。1080ppb標準的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。 8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般顯色時間為10min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到 15min(或更長),但不得超過 20min。反之,則減短反應時間。 9、濃縮洗滌液及其他試劑組分出現結晶請加熱(溫度不超60℃)溶解后使用。 10、該試劑盒最佳反應溫度為 37℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
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