本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被地西泮抗原，樣本中殘留的地西泮和此抗原競(jìng)爭(zhēng)地西泮的抗體（抗試劑），加入酶標(biāo)二抗（酶標(biāo)物）后，經(jīng)TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含地西泮的含量呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣本中地西泮的含量。?
適用范圍
可定性、定量檢測(cè)生鮮乳樣本中地西泮的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25°C）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8°C。切勿冷凍。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。?
4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL，到對(duì)應(yīng)的微孔中，然后加入地西泮抗試劑50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。?
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液250? μL/孔，充分洗滌4～5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、加酶標(biāo)物：加入地西泮酶標(biāo)物100μL/孔，輕輕振蕩混勻， ?? 用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min，取出重復(fù) ?? 步驟6。?
8、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加入底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min。?
9、測(cè)定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀，則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。?
結(jié)果判定?
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