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試劑盒
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伊維菌素ELISA檢測試劑盒

檢測項目:藥物殘留

適用樣本:生鮮乳

規(guī)格
96T/盒
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產(chǎn)品介紹
概述

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被伊維菌素抗原,樣本中殘留的伊維菌素和此抗原競爭伊維菌素的抗體(抗試劑),加入酶標二抗(酶標物)后,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含伊維菌素的含量呈負相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中伊維菌素的含量。

適用范圍

可定性、定量檢測生鮮乳樣本中伊維菌素的含量。

檢測步驟

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。

3、洗滌液在使用前也需回溫。

4、編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本:加入標準品/樣本100μL到對應(yīng)的微孔中,然后加伊維菌素抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

7、加酶標物:加入伊維菌素酶標物100μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復步驟6。

8、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min(見注意事項8)。

9、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。

結(jié)果判定

若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析(歡迎來電索取)

注意事項
1、室溫低于20°C或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25°C)會導致所有標準的OD值偏低。 2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。 3、每加一種試劑前需將其搖勻。 4、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。 5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。 6、儲存條件保存試劑盒于2~8°C,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質(zhì)的跡象發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。 8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到20min,但不得超過20min。反之,則減短反應(yīng)時間。 9、濃縮洗滌液如有結(jié)晶屬正常現(xiàn)象,請加熱溶解后使用。 10、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25°C,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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