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試劑盒
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牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒

檢測項目:營養(yǎng)成分

適用樣本:生鮮奶、巴氏殺菌奶、奶粉

規(guī)格
96T/盒
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產(chǎn)品介紹
概述

概要?

乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白,中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。 乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉(zhuǎn)運,而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗 癌、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等強大生物功能,被認為是一種新型抗菌、 抗癌藥物和極具開發(fā)潛力的食品和飼料添加劑。?

本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代牛乳鐵蛋白檢測產(chǎn)品,操作時間需 45min,能減少操作誤差和工作強度。?


實驗原理?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA 方法,在酶標微孔上預(yù)包被牛乳鐵蛋白抗體,預(yù)包被的牛乳鐵蛋白抗體與酶標抗體 (酶標物)同時與樣本中的牛乳鐵蛋白結(jié)合,形成抗體—牛乳鐵蛋白—酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與 牛乳鐵蛋白的含量呈正相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中牛乳鐵蛋白的含量。?


適用范圍?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒可定性、定量檢測奶粉樣本中牛乳鐵蛋白的含量。


貯藏條件及有效期?

貯藏條件:保存試劑盒于 2~8℃。?

有效期:該產(chǎn)品有效期為 12 個月。

檢測步驟

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 1 小時或 37℃溫箱平衡 30min 以上,注意每種液體試劑 使用前均須完全溶解搖勻。

2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本:加牛乳鐵蛋白酶標物 50μL/孔到對應(yīng)的微 孔中,再加入標準品或樣本 50μL/孔。輕輕振蕩混勻,用 蓋板膜蓋板后置 37℃避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?

6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置 37℃避光環(huán)境中反 應(yīng) 10min。?

8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔 OD 值。

注意事項
1、試劑及樣本沒有回溫到(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的 OD值偏低。 2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。 3、每加一種試劑前需將其搖勻。 4、反應(yīng)終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。 5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。 6、儲存條件: 保存試劑盒于 2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進原錫箔袋中重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質(zhì)的跡象:發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當棄之。1080ppb標準的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。 8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般顯色時間為10min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到 15min(或更長),但不得超過 20min。反之,則減短反應(yīng)時間。 9、濃縮洗滌液及其他試劑組分出現(xiàn)結(jié)晶請加熱(溫度不超60℃)溶解后使用。 10、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為 37℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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