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試劑盒
首頁 微生物檢測 PCR 金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(PCR-探針法)

金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(PCR-探針法)

檢測項目:細菌/真菌

適用樣本:原料、食品、水樣、環境等

規格
96T/盒
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產品介紹
概述

采用實時熒光PCR技術,針對金黃色葡萄球菌特異性基因設計引物和探針。PCR擴增過程中,與模板結合的探針被Taq酶分解產生熒光信號,熒光定量PCR儀根據檢測到的熒光信號繪制出實時擴增曲線,從而實現金黃色葡萄球菌在核酸水平上的定性檢測。

檢測步驟

1、樣品處理????????

1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質,調節pH至6.8±0.2。

2)36±1℃培養18-24h。

注:也可參考其他地方標準進行樣品的前處理。

2、核酸提取????????

1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。

2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應體系配置

從試劑盒中取出SA預混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進行PCR擴增反應。

4、PCR擴增???????

PCR管置于PCR儀上,推薦反應程序設定如下:反應體系為25μL,在第二步每個循環60℃時檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。

第一步

第二步

1次

45個循環

95℃

95℃

60℃√

72℃

5min

15s

30s√

30s

注:使用ABI系列PCR儀器,如果不添加ROX,此時“passive reference”和 “quencher”均選擇“none”。

注意事項
1、實驗前請仔細閱讀說明書,規范操作。 2、本品各組成成分均不得與其他產品或不同批號產品中的相應組成成分進行混用。 3、基因變異可能會導致假陰性結果。 4、實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染都可能會造成假陽性結果。 5、恰當處理實驗過程中的廢棄物和擴增產物。
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